產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
嘌呤霉素(Puromycin)是白黑鏈霉菌(Streptomyces alboniger)產(chǎn)生的一種氨基糖苷類抗生素,可快速、高效地終止真核與原核生物的蛋白質(zhì)合成。其結(jié)構(gòu)與氨酰-tRNA3′末端相似,能進(jìn)入核糖體A位并摻入延伸中的肽鏈,造成鏈的提前釋放與永久終止,從而殺死細(xì)胞:對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌作用最強(qiáng),對(duì)酸桿菌次之,對(duì)革蘭氏陰性菌及真核微生物(藻類、原生生物)亦有抑制;哺乳動(dòng)物和昆蟲細(xì)胞在2μg/mL以上濃度、48h內(nèi)即可被清除99%以上。此外,嘌呤霉素還表現(xiàn)出一定抗腫瘤活性,常被用作研究轉(zhuǎn)錄調(diào)控、細(xì)胞分化及基因表達(dá)順序的蛋白合成抑制劑。
抗性由pac基因編碼的嘌呤霉素N-乙酰轉(zhuǎn)移酶(PAC)賦予,該酶通過(guò)乙?;顾幬锸Щ?。由于pac基因已廣泛克隆至慢病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒及多種真核/原核表達(dá)載體,嘌呤霉素成為篩選和維持穩(wěn)定轉(zhuǎn)染/感染細(xì)胞株(尤其是慢病毒系統(tǒng))以及CRISPR/Cas9編輯后陽(yáng)性克隆的首選藥物。個(gè)別情況下亦可用于攜帶pac的大腸桿菌篩選。
本品為10mg/mL、經(jīng)0.22μm過(guò)濾除菌的嘌呤霉素鹽酸鹽水溶液,可直接用培養(yǎng)基稀釋。真核細(xì)胞常規(guī)篩選濃度1–10μg/mL,具體用量請(qǐng)依據(jù)細(xì)胞類型預(yù)實(shí)驗(yàn)確定。